CHO-K1 中国仓鼠卵巢细胞细胞名称
CHO-K1仓鼠卵巢细胞亚株
细胞描述
该细胞株是源自成年中国仓鼠卵巢深入活体组织切片的CHO细胞的亚克隆。在本库通过支原体检测。
动物种别：中国仓鼠
性别：雌
组织来源：卵巢
形态：上皮细胞
细胞驯化前的培养基的培养条件
F12K培养基(SIGMA,货号N3520，添加NaHCO3 2.5g/L)，90%；优质胎牛血清，10%。 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度。
供应限制：仅供研究之用。
细胞株驯化：
复苏CHO-K1细胞转入T25 cm2细胞培养瓶，以F12K基础培养基添加10%血清培养，待细胞长满单层后，加入 0.25 % 胰蛋白酶消化，传代至装有完全培养基的T25 cm2细胞培养瓶（Corning）中继续培养，当细胞铺满瓶底时，即得贴壁 CHO-K1 细胞。取贴壁CHO-K1 细胞，换液，加入15 mL含血清的完全基和 15 mL无血清CHO-K1专用培养基，2天后吸出一半培养液，加入等量的无血清CHO-K1，每2天重复一次此操作，直到胎牛血清浓度低于 1 %后，以基础培养基B001 继续培养，即培养基中血清浓度依次以 5 %，2 .5 %，1.25%，0.625 %，0 %降低。细胞在无血清CHO-K1专用培养基中密度达到5 ×106cells/ mL时，即得悬浮 CHO-K1 细胞。培养条件：37℃，5 % CO2培养箱中静置培养。
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备：CHO GROW CD2 培养基 (iCell-CHO-K1-001) 98 %
GlutaMAX-1谷氨酰胺 (iCell-0900 ) 1%
P/S青霉素-链霉素 （iCell-15140-122） 1%
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90% CHO-K1专用培养基，10%DMSO，现用现配。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3） 细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。
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